在日常的科研中我們時(shí)不時(shí)的會聽到小伙伴們在討論那些關(guān)于測序的東西，什么高通量測序，二代測序，Sanger測序等等。今天我們就用最簡單的言語來講解一下這三種測序技術(shù)。

一代測序技術(shù)，也被稱為Sanger測序，其實(shí)是由一個(gè)叫Sanger的人發(fā)明的一種測序方式。其利用了雙脫氧核苷酸會終止PCR的原理。比如：一條序列為ATCGCTA，我們進(jìn)行3次的雙脫氧核苷酸，第一次加入雙脫氧核苷酸A和正常的ATCG那么我們會得到下面兩種序列，A、ATCGCTA。那么我們就知道堿基A在序列的第一個(gè)堿基和第7個(gè)堿基。同理運(yùn)用雙氧核苷酸T和C，就會得整個(gè)序列的對應(yīng)堿基的位置BP信息。進(jìn)而得到整條序列的ATCG的序列信息。當(dāng)然這些都是由儀器進(jìn)行檢測的。

一代測序的特點(diǎn)：速度快，但是一次只能測一條單一的序列，且最長也就能測1000-1500bp。所以被廣泛應(yīng)用在單序列測序上。簡單概括就是，一代測序只能測一條長度在1000bp左右的序列。

二代測序技術(shù)，也被稱為高通量測序技術(shù)。它解決了一代測序只能測一條序列的缺陷。隨著科研的不斷深入，我們開始分析一個(gè)物種或樣本中的所有序列信息，這個(gè)時(shí)候一代測序一次測一條的方式就無法滿足我們的需求。二代測序技術(shù)就是在這樣的情況下誕生的。之所以稱其為高通量測序就是因?yàn)樗淮文軌蛲瑫r(shí)測很多的序列。我們通過物理或是化學(xué)的方式將DNA隨機(jī)打斷成無數(shù)的小片段（250-300bp），之后通過建庫（這里就不深入建庫的原理了）富集了這些DNA片段。接下來將建完的庫放入測序儀中測序，測序儀中有著可以讓DNA片段附著的區(qū)域，每一個(gè)片段都有獨(dú)立的附著區(qū)域，這樣測序儀可以一次檢測所有附著的DNA序列信息。最后通過生物信息學(xué)分析將小片段拼接成長片段。

二代測序特點(diǎn)：一次能夠測大量的序列，但是片段被限制在了250-300bp，由于是通過序列的重疊區(qū)域進(jìn)行拼接，所以有些序列可能被測了好多次。由于建庫中利用了PCR富集序列，因此有一些量少的序列可能無法被大量擴(kuò)增，造成一些信息的丟失，且PCR中有概率會引入錯(cuò)配堿基。所以三代測序就這樣誕生了。

三代測序其實(shí)就是對二代測序的一個(gè)升級，簡單來說就是它同樣一次能測好多序列，但是測序的長度達(dá)到了10kb左右，并且不需要PCR富集序列，直接測序，這就解決了信息的丟失，以及堿基錯(cuò)配的問題。但目前來說三代測序依然有一定的缺陷：三代測序技術(shù)依賴DNA聚合酶的活性，且成本很高，目前的錯(cuò)誤率在15%-40%，極大地高于二代測序技術(shù)的錯(cuò)誤率不過好在三代的錯(cuò)誤是完全隨機(jī)發(fā)生的，可以靠覆蓋度來糾錯(cuò)（但這要增加測序成本）。

最后我們再來用一個(gè)簡單的比喻來解釋這幾代技術(shù)。

任務(wù)：做1000張?jiān)嚲怼?/span>

一代測序：一個(gè)人一次只能做50張?jiān)嚲?，所以他無法做完這1000張。

二代測序：有500個(gè)人，每個(gè)人一次只能做10張?jiān)嚲?，且每個(gè)人隨機(jī)做這1000張中的10張?jiān)嚲?，最后匯總這500個(gè)人做的試卷，去除重復(fù)做的把不同的統(tǒng)一起來，這樣可以最大限度得完成1000張?jiān)嚲怼?/span>

三代測序：有30人，每個(gè)人一次能做100張?jiān)嚲?，之后的和二代一樣，匯總結(jié)果。

這樣是不是相對形象了一點(diǎn)（純屬幫助理解）。

其實(shí)這樣看來每一代技術(shù)都是為了解決上一代技術(shù)的短板，但是也產(chǎn)生了一些別的缺陷，但是隨著技術(shù)的進(jìn)步這些問題都會被解決。

以上的內(nèi)容只是為了幫助大家更好的理解這幾個(gè)技術(shù)，如有需要了解技術(shù)的細(xì)節(jié)內(nèi)容，歡迎咨詢我們——濟(jì)南東岱科學(xué)器材有限公司，我們有著豐富的二代測序經(jīng)驗(yàn)，且我們有自己的測序服務(wù)公司，期待與您的合作。